ブタβ-ヒューマン絨毛性ゴナドトロピン(β-HCG)酵素結合免疫測定キットの取扱説明書このキットは、研究用のみです。
麻薬名:
ジェネリック名:ブタベータヒト絨毛性ゴナドトロピン(β-HCG)ELISAキット
使用目的:
このキットは、ブタの血清、血漿、および関連する液体サンプルにおけるβ-ヒューマン絨毛性ゴナドトロピン(β-HCG)の測定に使用されます。
実験原則:
このキットは、二重抗体サンドイッチ法を使用して、標本のブタβ-ヒューマン絨毛性ゴナドトロピン(β-HCG)のレベルを決定します。微孔性プレートを精製ブタβ-ヒューマン絨毛性ゴナドトロピン(β-HCG)抗体でコーティングして、固相抗体を製造しました。ブタβ-ヒューマン絨毛性ゴナドトロピン(β-HCG)、次にHRP標識ヒト絨毛性ゴナドトロピンβ(β-HCG)抗体と組み合わせて、抗体抗酵素覚醒抗体抗体複合体を形成し、徹底的な洗浄後、徹底的なTMBは徹底的なTMBです。カラー開発用に追加されました。 TMBは、HRP酵素の触媒下で青に変換され、酸の作用下で最終黄色に変換されます。色の深さは、サンプルのヒトの絨毛性ゴナドトロピンβ(β-HCG)と正の相関があります。吸光度(OD値)は、450 nmの波長のマイクロプレートリーダーで測定され、サンプル中のブタβ-ヒューマンコリオン性ゴナドトロピン(β-HCG)の濃度は標準曲線で計算されました。
キット構成:
1 20回濃縮洗浄ソリューション30ml×1ボトル7停止ソリューション6ml×1ボトル
2酵素ラベル試薬6ml×1ボトル8標準(270μg / l)0.5ml×1ボトル
3酵素ラベルコーティングプレート12ウェルズ×8ストリップ9標準希釈1.5ml×1ボトル
4サンプル希釈液6ml×1ボトル10指示1コピー
5開発者ソリューション6ml×1ボトル11 2シーリングフィルム
6開発者B液体6ml×1 /ボトル12密閉バッグ1
標本要件:
1.標本は収集後にできるだけ早く抽出され、関連する文献に従って抽出が行われ、抽出後にできるだけ早く実験を行う必要があります。テストをすぐに実行できない場合は、試料を-20℃で保存できますが、繰り返し凍結と解凍は避ける必要があります
2. NAN3が西洋ワラディッシュペルオキシダーゼ(HRP)活性を阻害するため、NAN3を含むサンプルは検出できません。
ステップ:
1.標準製品の希釈と負荷:酵素でコーティングされたプレートに10個の標準ウェルを設定し、1枚目と2番目のウェルに100μlの標準製品を追加し、1枚目と2番目のウェルに標準製品を追加します。 50μlの希釈剤、よく混ぜます。次に、最初のウェルと2番目のウェルから100μlを摂取し、それぞれ3番目と4番目のウェルに加え、それぞれ3番目と4番目のウェルに50μlの標準希釈溶液を追加し、3番目と4番目のウェルでそれぞれ50μlを摂取しますそれを捨ててから、それぞれ50μlを5番目と6番目のウェルに加え、それぞれ5番目と6番目のウェルに標準希釈溶液をそれぞれ追加し、ウェルを混ぜます。混合した後、5番目と6番目の井戸から50μlを摂取し、それぞれ7番目と8番目の井戸に加えます。次に、50μlの標準希釈溶液をそれぞれ7番目と8番目のウェルに加えます。 8つの井戸から50μLを取り、9番目と10番目の井戸に追加します。次に、それぞれ50μlの標準希釈溶液を9番目と10番目のウェルに加えます。混合した後、9番目と10番目のウェルから50μLを取り、廃棄します。 (希釈後、各ウェルの体積は50μlで、濃度は180μg / L、120μg / L、60μg / L、30μg / L、15μg / Lです)。
2.サンプルの追加:空白の井戸をセットアップします(空白のコントロールウェルはサンプルや酵素試薬を追加せず、残りのステップは同じです)とテストするサンプルウェル。酵素でコーティングされたプレートのテストサンプルウェルにサンプル希釈液を40μLし、10μLのテストサンプルを加えます(サンプルの最終希釈は5回です)。サンプルを追加して、マイクロプレートの井戸の底にサンプルを追加し、井戸の壁に触れないようにして、そっと振ります。
3.インキュベーション:プレートをシーリングフィルムで密封し、37°Cで30分間インキュベートします。
4.混合ソリューション:蒸留水で20回濃縮洗浄液を20回希釈し、予備
5.洗浄:シーリングフィルムを慎重に剥がし、液体を廃棄し、ドライを回転させ、洗濯溶液を十分に満たし、30秒間放置し、廃棄し、5回繰り返して乾燥させます。
6.酵素を追加:空白の井戸を除き、各ウェルに50μlの酵素標識試薬を追加します。
7.インキュベーション:操作は3と同じです。
8.洗浄:操作は5と同じです。
9.カラー開発:50μlの開発者Aを各ウェルに追加し、50μlの開発者Bを追加し、穏やかに混ぜ、暗闇の中で37℃で色を作成します
15分。
10.終了:各ウェルに50μlの停止溶液を追加して反応を停止します(この時点で青は黄色に変わります)。
11.決定:ゼロおよび450 nmの波長の空白のエアコンを使用して、各ウェルの吸光度(OD値)を順番に測定します。測定は、停止溶液を追加してから15分以内に実行する必要があります。
計算:
標準の濃度をAbscissaとして、OD値を縦座標として取得し、座標用紙に標準曲線を描き、サンプルのOD値に従って標準曲線からの対応する濃度を見つけます。希釈係数を掛けます。または、標準の濃度を使用して、標準曲線の線形回帰方程式をOD値で計算し、サンプルのOD値を方程式に置き換え、サンプル濃度を計算し、希釈係数を掛けて実際の濃度の濃度を取得します。標本、見本。
予防:
1.キットは冷蔵環境から取り出し、使用する前に15〜30分間室温で平衡化する必要があります。酵素でコーティングされたプレートが開いた後に封印されていない場合、ストリップは密閉袋に保管する必要があります。
2.結晶は濃縮洗浄液で沈殿する可能性があります。濃縮洗浄液は、希釈中に加熱して水浴に溶解することができ、洗浄中に結果は影響を受けません。
3.サンプラーをサンプルの追加の各ステップで使用する必要があります。また、テストエラーを避けるために精度を定期的にチェックする必要があります。サンプリング時間を5分以内に制御するのが最善です。多くの標本がある場合は、サンプルを追加するためにボレーガンを使用することをお勧めします。
4.各測定と同時に標準曲線を作成してください。二重穴を作るのが最善です。試料でテストする物質の含有量が高すぎる場合(サンプルのOD値は標準ウェルの最初のウェルのOD値よりも大きい場合)サンプルが希釈し、それを決定します。複数(×n×5)。
5.シーリングフィルムは、相互汚染を避けるために1回の使用に限定されています。
6.基板を光から遠ざけてください。
7.指示に厳密に従うと、テスト結果はマイクロプレートリーダーによって決定される必要があります。
8.すべてのサンプル、洗浄液、およびさまざまな廃棄物は、感染剤として扱う必要があります。
9.この試薬のさまざまなバッチのコンポーネントを混合してはなりません。
10.英語のマニュアルに違いがある場合、英語のマニュアルが勝ちます。
試験範囲:
10μg / l-200μg / l
仕様:
96サービング /ボックスストレージ条件と有効期限
1.キットストレージ:; 2-8℃。
2.妥当性:6か月
